地龙的多重位点特异性PCR鉴别

摘要：

目的:近年来,中药材地龙的商品价格不断上涨,市场的混伪品随之增加.其主要鉴别特征在药材中大部分丢失,难以区分.因此,急需建立一种准确、稳定的中药材地龙基原鉴别方法.方法:根据地龙及其混伪品的COI基因序列差异找到变异位点,从而设计参环毛蚓、通俗环毛蚓、威廉环毛蚓及栉盲环毛蚓的特异性鉴别引物,优化反应体系并进行耐受性和适用性的考察和验证.在此基础上将特异性引物组合,构建多重聚合酶链式反应(PCR)体系,从而建立了一种高效准确、操作简便、专属性强、重复性好的中药材地龙及其常见混伪品的多重位点PCR鉴别方法.结果:在该方法下广地龙基原参环毛蚓可得到366 bp片段,沪地龙基原通俗环毛蚓和威廉环毛蚓可得到487 bp片段,栉盲环毛蚓可得到475 bp片段,其他混伪品均无条带.将之组合形成的多重PCR可在一次鉴定操作中根据条带位置同时鉴别沪地龙和广地龙.结论:该文所建立的多重位点特异性PCR鉴别方法可准确鉴别中药材地龙真伪.

关键词：地龙、多重位点特异性聚合酶链式反应、分子鉴别、混伪品、参环毛蚓、通俗环毛蚓、威廉环毛蚓、栉盲环毛蚓

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分类号：R284.2;R285;R22;R2-031(中药学)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项;中央本级重大增减支项目;中国中医科学院中药资源中心自主选题项目

在线出版日期：2019-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：124-129