二苯乙烯苷调控CREB/BDNF信号通路对Aβ25-35损伤的小鼠神经元突触的保护作用

摘要：

目的:研究中药何首乌有效成分二苯乙烯苷(TSG)对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)损伤的小鼠海马神经元的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:小鼠海马神经元细胞分离自新生48 h内胎鼠大脑海马,培养9d待神经元成熟后,采用免疫荧光法对其进行鉴定.将培养成熟的神经元细胞分为正常组、模型组(Aβ25-35孵育造模)和TSG组(Aβ25-35孵育造模后,分别加入TSG 6.25,12.5,25,50,100 μmol·L-1).细胞增殖毒性检测(CCK-8)试剂盒和乳酸脱氢酶(LDH)法检测各组细胞活性,免疫荧光法检测突触素-1 (SYN-1)蛋白的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测突触后膜致密蛋白-95(PSD-95)和突触体素(SYP)的含量,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA的表达,免疫荧光法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测CREB,磷酸化CREB(p-CREB)和BDNF蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组细胞存活率显著降低,LDH释放量显著增高(P＜0.01),SYN-1,PSD-95和SYP的含量明显降低(P＜0.05,P＜0.01),p-CREB和BDNF mRNA及蛋白的表达明显下调(P ＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,不同浓度TSG均可提高细胞存活率,降低LDH释放量(P ＜0.05,P＜0.01),TSG对Aβ25-35造模的小鼠海马神经元细胞的最适治疗浓度为25 μmol·L-1;25 μmol·L-1 TSG能够显著增强SYN-1的表达量(P＜0.01),明显提高PSD-95和SYP的含量(P＜0.05);上调p-CREB和BDNF mRNA及蛋白的表达(P ＜0.05,P＜0.01),但对CREB mRNA及蛋白的表达无显著影响.结论:TSG对Aβ25-35损伤的小鼠海马神经元突触具有保护作用,其机制可能与促进CREB的磷酸化使p-CREB表达增多,并促进神经营养因子BDNF的释放有关.

关键词：二苯乙烯苷、β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)、突触、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子信号通路

所属期刊栏目：25

分类号：R2-0;R285.5;R246.6

资助基金：辽宁省自然科学基金;江苏食品药品职业技术学院博士科研启动基金

在线出版日期：2019-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：50-56