异甘草素对人肾透明细胞癌786-O细胞抗癌作用及分子机制

摘要：

目的:研究异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)对人肾透明细胞癌786-O细胞的抗癌作用,并探讨其可能存在的分子机制.方法:通过噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测ISL(0,10,25,50,75,100 μmo1·L-1)对786-O细胞增殖的作用;细胞划痕和Transwell实验检测ISL对786-O细胞迁移、侵袭能力的影响;吖啶橙染色,Ad-GFP-LC3转染实验观察细胞自噬状态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白的表达,并分析磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路变化,探讨其可能的作用机制.结果:MTT比色法结果显示,与空白组比较,ISL能够明显抑制786-O细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖性(P＜0.05);划痕和Transwell实验结果表明,与空白组比较,ISL能够抑制785-O细胞的迁移和侵袭(P＜0.05);吖啶橙染色和Ad-GFP-LC3转染实验表明ISL能够诱导786-O细胞发生自噬.此外,与空白组比较,ISL能够诱导细胞内自噬标志物-Ⅱ(LC3-Ⅱ),自噬相关蛋白Beclin1,Atg5蛋白表达(P＜0.05),并显著下调p62蛋白表达(P＜0.05),当加入自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)可逆转上述现象(P＜0.05);同时ISL能够抑制Akt,mTOR的磷酸化水平(P＜0.05),加入抑制剂LY294002和雷帕霉素(rapamycin,Rap),LC3-Ⅱ,Beclin1,Atg5蛋白表达明显上调(P＜0.05),p62蛋白表达明显下调(P＜0.05).结论:ISL能够抑制肾透明细胞癌786-O细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导细胞发生自噬.

关键词：异甘草素(isoliquiritigenin)、肾透明细胞癌、786-O细胞、自噬、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路

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分类号：R22;R242;R2-031;R285.5(中医基础理论)

资助基金：黑龙江省教育厅科研项目10541149

在线出版日期：2019-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：83-89