川芎嗪对t-BHP致PC12细胞损伤的保护及机制

摘要：

目的:研究川芎嗪(TMP)对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响.方法:培养PC12细胞,孵育不同浓度的川芎嗪(1O,25,50,100,200 μmol·L-),12 h后采用细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)确定川芎嗪的保护浓度.随后将PC12细胞分为空白组,t-BHP组,TMP组.空白组加入培养基,t-BHP组加入t-BHP(200 μmol·L-1),TMP组加入TMP(25,50,100μmol.L-1)预处理12h后加入t-BHP(200 μmol·L-).共作用6h后采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、活性氧(ROS)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),Akt,磷酸化Akt (p-Akt)及mTOR,p-mTOR的表达情况.结果:与空白组比较,t-BHP组细胞生存率降低(P＜0.01),与t-BHP组比较,25,50,100 μmol ·L-的川芎嗪促进细胞增殖(P＜0.05,P＜0.01),其中50 μmol·L-1组的细胞增殖率最高(P＜0.01);与空白组比较,t-BHP组LDH的释放量,ROS和MDA含量显著增加(P＜0.01),SOD和GSH-Px的活性显著降低(P＜0.01),与t-BHP组比较,TMP组LDH的释放量,ROS和MDA含量显著降低(P ＜0.05,P＜0.01),SOD和GSH-Px的活性显著升高(P ＜0.05,P＜0.01);Western blot表明与空白组比较,t-BHP组中p-Akt,p-mTOR蛋白表达水平明显下降(P＜0.01),Bcl-2/Bax值明显降低(P＜0.01),与t-BHP组比较,TMP(50 μmol·L-1)组中p-Akt,p-mTOR蛋白表达水平明显上升(P＜0.05),Bcl-2/Bax值明显上升(P＜0.05).另外LY294002(PI3K蛋白抑制剂)处理减弱了这些变化.结论:川芎嗪通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路保护t-BHP诱导的PC12细胞损伤.

关键词：川芎嗪、神经保护、PC12细胞、叔丁基过氧化氢(t-BHP)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)

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分类号：R2-0;R22;R285.5

资助基金：国家自然科学基金;广州市科创委项目

在线出版日期：2019-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：67-72