血根碱通过调控PI3K/Akt信号通路诱导胰腺癌细胞凋亡的机制

摘要：

目的:探讨血根碱对胰腺癌细胞凋亡的影响及其信号通路调控机制.方法:不同浓度血根碱(2,4,6 μmol·L-)处理小鼠胰腺癌Panc02细胞不同时间(24,48,72 h)后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测血根碱对细胞生长抑制作用的影响;采用磷脂结合蛋白V/碘化丙啶(Annexin V/PI)双染色试剂盒通过流式细胞仪检测血根碱对Panc02细胞凋亡影响;采用花青染料(JC-1)探针试剂盒荧光染料分析检测线粒体膜电位的变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),总蛋白激酶B(Akt),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt),总磷脂酰肌醇3激酶(PI3K),磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)的表达情况.结果:与空白组比较,不同浓度的血根碱作用同一时间后,随着药物浓度的增加细胞生长抑制率逐渐升高(P＜0.05),与空白组比较,同一浓度作用不同时间后,随着时间的增加细胞生长抑制率逐渐升高(P＜0.05);与空白组比较,血根碱2 μmol·L-组的细胞凋亡率无明显升高,与空白组比较,血根碱4,6μmol·L-组的细胞凋亡率均明显升高(P＜0.05);与空白组比较,血根碱2 μmol· L-1组时红绿荧光无变化,血根碱4,6 μmol·L-组红色荧光减弱,绿色荧光增强,Panc02细胞线粒体膜电位降低;与空白组比较,血根碱2μmol· L-组处理的Bax,Bcl-2,p-PI3K,p-Akt,Akt和PI3K蛋白表达均无变化,血根碱6 μmol·L-组Bax蛋白表达增高,Bcl-2及PI3 K/Akt信号通路中关键蛋白p-PI3K,p-Akt表达降低(P＜0.05).结论:血根碱通过抑制PI3 K/Akt信号通路有效地诱导小鼠胰腺癌Panc02细胞经线粒体凋亡途径发生凋亡.

关键词：胰腺癌、血根碱、细胞凋亡、Panc02细胞、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路

所属期刊栏目：24

分类号：R735;R22;R242;R2-031;R285.5(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81602496

在线出版日期：2018-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：166-171