自噬对双去甲氧基姜黄素诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用的影响

摘要：

目的:探讨自噬对双去甲氧基姜黄素诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用的影响.方法:以24 mg·L-1双去甲氧基姜黄素或联合5 mol·L-1自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤 (3-methyladenine, 3-MA) 对HepG2细胞作用24, 48 h, 以四甲基偶氮唑盐 (methye thiazolye telrazlium, MTT) 比色法检测细胞活力;以24 mg·L-1双去甲氧基姜黄素单用或联合3-MA对HepG2细胞作用48 h, Hoechst 33342染色倒置荧光显微镜观察细胞凋亡形态, 磷脂结合蛋白V/碘化丙啶 (Annxin V/propidium iodide, PI) 双染检测细胞凋亡率, 罗丹明123 (Rhodamine 123, Rh123) 染色检测线粒体膜电位, 蛋白免疫印迹法 (Western blot) 检测自噬相关蛋白Beclin-1, LC3, 半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3), 活化型Caspase-3 (cleaved Caspase-3), B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2), Bcl-2相关X蛋白 (Bax) 的活性表达.结果:与空白组比较, 双去甲氧基姜黄素可抑制HepG2细胞增殖, 诱导细胞凋亡, 降低线粒体膜电位, 使pro-Caspase-3, Bcl-2, LC3-Ⅰ蛋白表达降低 (P＜0.01), 升高cleaved Caspase-3, Bax, Beclin-1, LC3-Ⅱ蛋白的表达 (P＜0.01);3-MA可增强双去甲氧基姜黄素所诱导的HepG2细胞凋亡, 提高凋亡率 (P＜0.01), 增加其降低线粒体膜电位作用 (P＜0.01), 明显下调pro-Caspase-3, Bcl-2蛋白的表达 (P＜0.01), 并上调Beclin-1, LC3, cleaved Caspase-3蛋白的表达 (P＜0.01) .结论:双去甲氧基姜黄素可经线粒体机制诱导HepG2细胞凋亡, 并诱导细胞自噬, 自噬对凋亡有抑制作用.

关键词：双去甲氧基姜黄素、3-甲基腺嘌呤、肝癌、细胞凋亡、线粒体膜电位

所属期刊栏目：24

分类号：R22;R242;R2-031;R273;R285.5(中医基础理论)

资助基金：山东省高校科研发展计划项目J11LF68;山东省中医药科技发展计划项目2011-151

在线出版日期：2018-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：167-171