清热化痰解毒方对脑缺血再灌注大鼠肺组织TXNIP/NLRP3炎性通路的影响

摘要：

目的:探究清热化痰解毒方对脑缺血再灌注大鼠肺组织的影响,并初步探讨相关分子机制.方法:将SD大鼠分为假手术组、模型组、阳性药组(灌胃尼莫地平200 mg·kg -1)、清热化痰解毒方低、高剂量组(100,200 mg·kg -1 ),每组10只,除假手术组外,采用改良4动脉阻断法制备大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,造模后,给药3 d.肺湿/干重(W/D)分析,采用苏木素-伊红(HE)染色进行组织病理学分析;酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(interleukin,IL)-lβ和 IL-18水平;肺髓过氧化物酶试剂盒检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性;免疫组化分析核苷酸结合域样受体蛋白3 (nucleotide-binding domain-like receptor 3, NLRP3 )阳性细胞数;半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1 )比色测定试剂盒检测 Caspase-1活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3, ASC, Caspase-1 mRNA和蛋白表达,免疫共沉淀检测硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)-NLRP3蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组肺损伤评分,肺W/D,BALF中IL-1β和IL-18水平、总细胞和多形核白细胞数量,MPO活性均明显增加(P ＜ 0.05 );与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺损伤评分,肺W/D,BALF中IL-lβ和IL-18水平、总细胞和多形核白细胞数量及MPO活性均明显降低(P＜0.05).与假手术组比较,模型组肺组织中NLRP3阳性细胞数,Caspase-1活性,NLRP3,ASC, Caspase-1蛋白和mRNA相对表达明显增加(P ＜ 0.05 );与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺组织中 NLRP3阳性细胞数,Caspase-1活性,NLRP3,ASC,Caspase-l蛋白和mRNA相对表达均明显降低(P ＜ 0.05 ).与假手术组比较,模型组肺组织中ROS产生,TXNIP蛋白表达均明显增加(P＜0.05);与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺组织中ROS产生,TXNIP蛋白表达均明显降低(P＜0.05).与假手术组比较,模型组肺组织中TXNIP-NLRP3蛋白共沉淀增加.与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺组织中TXNIP-NLRP3蛋白共沉淀减少.结论:清热化痰解毒方对全脑缺血再灌注大鼠的炎症性肺损伤具有保护作用,且这种作用可能通过抑制ROS产生,从而抑制TXNIP-NLRP3炎症通路介导的促炎介质IL-1β和IL-18的分泌,最终抑制肺组织中炎性细胞浸润,缓解肺组织损伤.

关键词：脑缺血再灌注、清热化痰解毒方、肺损伤、核苷酸结合域样受体蛋白3 (NLRP3)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)

所属期刊栏目：24

分类号：R22;R24;R285.5;R289(中医基础理论)

资助基金：河北省科技计划项目132777203

在线出版日期：2018-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：114-122