甘草苷对中波紫外线诱导人皮肤角质形成细胞凋亡的影响

摘要：

目的:研究甘草苷对中波紫外线(UVB)诱导人皮肤角质形成细胞(HaCaT)凋亡的影响.方法:以不同浓度的甘草苷作用于HaCaT细胞,噻唑蓝(MTT)比色法筛选甘草苷的有效安全浓度;用30 mJ·cm-2的UVB作用于HaCaT细胞,建立光老化模型,MTT比色法检测光老化HaCaT细胞增殖率;流式细胞术检测各组细胞中活性氧自由基(ROS)含量和总凋亡率;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测光老化HaCaT细胞中半胱氨酸天冬氨酸-3(Caspase-3),半胱氨酸天冬氨酸-9(Caspase-9) mRNA表达水平;蛋白免疫印记法(Western blot)检测光老化HaCaT细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量.结果:筛选出甘草苷的最佳有效安全浓度为1×10-7,1 × 10-6,1×10-5mol·L-1.与空白组比较,UVB组细胞增殖率显著降低(P＜0.01),细胞中ROS含量和总凋亡率显著升高(P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著升高(P＜0.01);Bcl-2蛋白表达量显著降低(P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著升高(P＜0.01).与UVB组比较,1×10-7,1×10-6,1×10-5mol·L-1甘草苷+UVB组细胞增殖率显著升高(P＜0.01);细胞中ROS含量和总凋亡率显著降低(P ＜0.05,P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9 mRNA表达水平显著降低(P＜ 0.05,P＜0.01);Bcl-2蛋白表达量显著升高(P ＜0.05,P＜0.01),Caspase-3,Caspase-9蛋白表达量显著降低(P＜0.05,P＜0.01).结论:甘草苷能通过促进抗凋亡因子Bcl-2蛋白的表达,减少促凋亡相关细胞因子Caspase-3,Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,从而抑制UVB诱导的HaCaT细胞凋亡.

关键词：甘草苷、中波紫外线、人皮肤角质形成细胞、凋亡、半胱氨酸天冬氨酸-3 (Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸-9 (Caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)

所属期刊栏目：24

分类号：R24;R285.5;R275.9(中医临床学)

资助基金：黑龙江省应用技术研究与开发计划PC13S15

在线出版日期：2018-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：96-101