三斑海马蛋白质组学双向电泳技术的建立与优化

摘要：

目的:建立适于三斑海马干药材蛋白质组研究的双向电泳技术,为后期进行深入的中药材海马蛋白组学研究奠定基础.方法:对影响蛋白质双向电泳的几个关键环节——提取方法、裂解液、纯化方法、上样量进行优化,筛选最佳方法流程.结果:优化出的海马蛋白质提取方法为液氮研磨法,最佳蛋白质提取裂解液为7 mol·L-1尿素,2 mol· L-硫脲,含4％Chaps,1 mmol·L-1 PMSF,65 mmol·L-DTT和0.2％ Bio-Lyte,最佳蛋白质纯化方法为超滤+TCA丙酮沉淀两步纯化法,双向电泳最佳上样量为300 pg.Image master 7.0软件对电泳图谱分析共检测出三斑海马蛋白质斑点236个,相对分子质量在14.4～97.4 kDa均有分布,分布差异不明显;蛋白质等电点主要分布在pH 4～9,其中以碱性蛋白质最为丰富.结论:利用上述方法所得的双向电泳图谱斑点清晰、分离均匀,图谱质量佳,该方法流程适合三斑海马药材蛋白质组学分析.该研究能为后期进行深入的海马蛋白质组学研究,筛选特征性蛋白质奠定基础.

关键词：三斑海马、双向电泳、蛋白质组学、动物药

所属期刊栏目：24

分类号：R284.1;R931.74;R22;R22-03(中药学)

资助基金：国家自然科学基金项目;四川省中医药管理局青年中医药研究项目

在线出版日期：2021-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：50-54