10.13422/j.cnki.syfjx.2017070148
九味通窍汤对人脑胶质瘤的体外药效学研究及组方分析
目的:对九味通窍汤进行组方拆分,并对各组进行体外抗脑胶质瘤药效学分析,对其体外药效学可能的作用机制进行探索,为探究全方起效的物质基础提供实验依据.方法:根据君臣佐使组合原理将九味通窍汤拆分成7个组方,选用人源脑神经胶质瘤U251细胞进行体外药效筛选,采用噻唑蓝(MTT)法测定各个组方对细胞活力的影响;采用流式细胞术比较所得体外药效最佳组方Ⅳ与全方(10,4,1 g·L-1)作用U251细胞24 h对细胞的凋亡影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测全方及组方Ⅳ对凋亡蛋白p53和抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达影响;组方Ⅳ的醇提物用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯及水饱和正丁醇梯度萃取,采用MTT法测定各萃取部位对U251细胞增殖的抑制作用.结果:组方Ⅳ对细胞的抑制作用最为明显,且具有浓度依赖性;细胞经10,4,1g·L-1组方Ⅳ,全方处理24 h后凋亡率显著高于空白组(P<0.01);细胞经4 g·L-1组方Ⅳ,全方处理后Bcl-2蛋白表达水平较空白组显著降低(P<0.01),p53蛋白表达较空白组显著提高(P<0.01);组方Ⅳ梯度萃取后部位Ⅲ对细胞活力的抑制作用最为明显,且具有浓度依赖性.结论:组方Ⅳ细胞活力抑制作用明显,诱导细胞凋亡明显,并可以降低Bcl-2,并提高p53蛋白的表达;部位Ⅲ抑制脑胶质瘤细胞活力明显.
九味通窍汤、脑胶质瘤、组方分析、体外药效学、凋亡蛋白p53、B淋巴细胞瘤-2
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R285.5(中药学)
江苏省中医药局科技项目LZ11117
2017-04-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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