氧化苦参碱对醛固酮诱导心肌细胞损伤的保护作用

摘要：

目的:研究氧化苦参碱(OMT)对醛固酮(ALD)诱导心肌细胞损伤的保护作用,并分析其对盐皮质激素受体(MR)转录和表达的影响.方法:采用胰酶消化差速贴壁法分离纯化新生Sprague-Dawley(SD)大鼠原代心肌细胞,采用肌钙蛋白和肌动蛋白免疫细胞化学法鉴定心肌细胞及其纯度,并建立ALD诱导的细胞损伤模型.采用噻唑蓝(MTT)法确定ALD导致心肌细胞损伤的最佳作用浓度与时间.实验分为空白组(无血清培养基),ALD组(最佳刺激浓度组),OMT高剂量(ALD+100 mg·L-1OMT)组和OMT低剂量(ALD +50 mg·L-10MT)组.OMT预保护2h,继续加入ALD共同作用36 h,并用MTT法和乳酸脱氢酶(LDH)外漏检测分析OMT对ALD诱导心肌细胞膜损伤的保护作用.逆转录-PCR (RT-PCR)分析MR mRNA水平.免疫印迹法(Western blot)检测MR和醛固酮合成酶(CYP11 B2)的蛋白表达.结果:16 mg·L-1 ALD诱导心肌细胞36 h后能显著引起细胞损伤,OMT(50,100 mg·L-1)能够抑制ALD诱导的细胞活力下降及LDH外漏量升高.同时,OMT(50,100mg· L-1)能够抑制ALD诱导的MR mRNA水平和蛋白表达升高,上调CYP11 B2蛋白表达.结论:OMT对ALD诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,其机制可能与抑制ALD-MR系统激活有关.

关键词：氧化苦参碱、醛固酮、盐皮质激素受体、心肌细胞、醛固酮合成酶

所属期刊栏目：22

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;新世纪优秀人才支持计划;贵州省科学技术基金项目;贵州省优秀科技教育人才省长专项;贵州省高等教育科技创新人才团队建设项目;贵州省科技创新人才团队建设项目;贵州省高层次创新型人才培养项目

在线出版日期：2016-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：76-80