加味四君子汤含药血清对肝癌Hep-G2细胞的影响

摘要：

目的:探讨加味四君子汤含药血清对肝癌Hep-G2细胞增殖、凋亡、周期的影响及其作用机制.方法:不同浓度加味四君子汤含药血清处理Hep-G2细胞后,采用细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖;AnnexinV/碘化丙啶(PI)流式细胞术检测细胞凋亡率和周期;hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡形态;免疫印迹法(Western blot)检测细胞中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白表达水平.结果:加味四君子汤含药血清呈浓度依赖性抑制肝癌Hep-G2细胞的增殖,诱导Hep-G2细胞凋亡,阻滞细胞于G0/G1期.hoechst33342染色后,随着含药血清浓度的增加,Hep-G2细胞核显著呈碎块状致密浓染.同时,加味四君子汤含药血清能够抑制Hep-G2细胞Akt,mTOR,核糖体S6蛋白激酶(S6),真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)的磷酸化,从而上调Bcl-2相关X蛋白(Bax)和下调细胞周期蛋白(CyclinD1),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达.加味四君子汤含药血清与300 nmol·L-1的PI3 K/mTOR双重抑制剂VS-5584联合使用具有协同作用,含药血清能增强PI3K/mTOR双重抑制剂VS-5584对Hep-G2细胞中PI3 K/Akt/mTOR信号通路靶点Akt和mTOR磷酸化的抑制作用.结论:加味四君子汤含药血清能抑制Hep-G2细胞的增殖,诱导其凋亡,阻滞其于G0/G1期,其机制可能通过阻断PI3 K/Akt/mTOR信号通路而实现.

关键词：加味四君子汤、含药血清、肝癌HepG2细胞、增殖、凋亡、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路

所属期刊栏目：22

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：广州市海珠区科普计划S2013010014796;2014HZKP-DS-2

在线出版日期：2016-10-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：88-93