健脾补肾清肠化湿方对静脉移植MSCs向溃疡性结肠炎大鼠结肠迁移分化的影响

摘要：

目的:观察健脾补肾清肠化湿方对静脉移植的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向溃疡性结肠炎模型大鼠结肠迁移归巢的影响.方法:体外分离培养SD大鼠MSCs,传至第3代,制备细胞悬液,加入0.78 mg·L-1健脾补肾清肠化湿方共培养,并以4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)荧光标记备用.大鼠分为空白组,模型组,MSCs组,干预MSCs组和联合组.2,4,6三硝基苯磺酸(TNBS)法建立溃疡性结肠炎大鼠模型,空白组、模型组大鼠尾静脉分别iv1mL生理盐水,MSCs组大鼠,iv 1 mL MSCs(1×106个),干预MSCs和联合组大鼠分别尾静脉iv体外中药干预的MSCs(1×106个),联合组再予健脾补肾清肠化湿方13.6 g·kg-1,ig 10d.第5,10天每组各处死5只大鼠,结肠标本进行大体形态和组织学评估,共聚焦显微镜观察各组DAPI标记MSCs在结肠内迁移情况,免疫组化检测肠干细胞标记物神经细胞RNA结合蛋白(Musashi-1)的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠结肠可见广泛充血水肿,伴糜烂,肉眼可见溃疡形成,提示造模成功.除模型组和正常组外,各移植组结肠组织均能检测到DAPI标记的MSCs,且数量随时间的延长而逐渐增加;各治疗组均能改善大鼠结肠组织大体形态和组织病理,且第10天联合组优于MSCs组(P＜0.05);各移植组能提高Musashi-1的表达,第10天联合组和干预MSCs组优于MSCs组(P＜0.05).结论:健脾补肾清肠化湿方能促进MSCs向结肠溃疡部位的迁移和分化,并能修复受损的结肠黏膜.

关键词：溃疡性结肠炎、健脾补肾、清肠化湿、骨髓间充质干细胞、移植、迁移

所属期刊栏目：21

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;中医药行业科研专项;国家中医药管理局项目;江苏省临床医学科技专项;江苏高校优势学科建设工程项目;国家中医临床研究基地业务建设科研专项

在线出版日期：2015-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：88-92