10.13422/j.cnki.syfjx.2015180111
甘草查尔酮A对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外迁移能力的影响
目的:探讨甘草中黄酮类化合物甘草查尔酮A(licochalcone A,LCA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞株体外迁移能力的影响.方法:取对数生长期B16F10细胞按8 000个/孔接种于96孔板中,磺酰罗丹明B(SRB)法测定LCA(0,5,10,15,20 μmol·L-1)作用24 h对细胞活力影响;取对数生长期B16F10细胞按1×105个/孔接种于24孔板中,划痕实验检测LCA(0,5,10,15 μmol· L-1)作用24 h细胞体外迁移能力;取对数生长期B16F10细胞按5×105个/瓶接种于细胞培养瓶中,LCA(0,5,10,15 μmol·L-1)作用24 h后,明胶酶谱法检测细胞培养上清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性;ELISA检测MMP-2和MMP-9蛋白含量;实时荧光定量PCR(Q-PCR)和半定量PCR(RT-PCR)法检测MMP-2和MMP-9基因表达水平.结果:5 ~ 15μmol·L-1的LCA对小鼠黑色素瘤B16F10细胞作用24 h,对细胞活力没有显著的影响;划痕试验结果说明,LCA可剂量依赖性地降低B16F10细胞的体外迁移能力;明胶酶谱结果显示,LCA可明显抑制B16F10细胞分泌MMP-2和MMP-9的活性;ELISA试验表明,LCA可明显降低MMP-2和MMP-9蛋白表达;Q-PCR和RT-PCR结果显示,LCA可明显降低MMP-2和MMP-9的mRNA基因表达量.结论:甘草查尔酮A能抑制B16F10小鼠黑色素瘤细胞体外转移侵袭作用,其机制可能与抑制MMP-2和MMP-9表达有关.
甘草查尔酮A、抗转移、基质金属蛋白酶、小鼠黑色素瘤B16F10细胞
21
R285.5(中药学)
国家自然科学基金31471338
2015-10-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
111-114