LC-MS/MS同时测定小鼠脑组织中7种神经递质含量

摘要：

目的:建立一种同时测定小鼠脑组织中7种神经递质的LC-MS/MS分析方法.方法:小鼠脑组织加入4倍量冰冷的0.2％甲酸-水超声匀浆,匀浆液加入0.2％甲酸-乙腈沉淀蛋白,离心,取上清液,加入内标,混匀后进LC-MS/MS分析.采用TSK Gel amide 80(4.5 mm×150 mm,5μm)色谱柱,柱温35℃,流动相乙腈-6mmol·L-1甲酸铵水溶液(pH 5.5)(67.5∶ 32.5),流速0.2 mL· min-1,采用正离子多反应检测(MRM)模式进行扫描.通过动物试验验证LC-MS/MS的可靠性,并考察酸枣果肉对小鼠神经递质水平的影响.结果:多巴胺(DA)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)、乙酰胆碱(Ach)、γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)的最低检测限均＜0.1 μg·L-1,精密度RSD分别为0.52％,0.71％,0.98％,0.35％,0.32％,0.46％,0.94％,准确度RSD分别为0.67％,0.46％,0.53％,0.72％,0.48％,0.59％,0.82％,均符合生物样品的分析要求.动物试验显示与空白组相比,小鼠给予多奈哌齐后,海马和皮层中乙酰胆碱水平极显著升高；而东莨菪碱则作用相反,给药后会降低脑内乙酰胆碱含量,与空白组相比,具有极显著差异.小鼠口服酸枣果肉后,脑内多种神经递质明显发生改变,且变化规律与阳性药物舒乐安定相同.结论:建立的LC-MS/MS分析方法可应用于神经精神类药物的药理作用机制研究.

关键词：神经递质、LC-MS/MS、脑组织、酸枣仁、阳性药物、含量测定、动物试验、作用机制

所属期刊栏目：19

分类号：R945(药剂学)

资助基金：科技部对欧盟科技合作专项0901,1108;”重大新药创制”国家科技重大专项2012ZX09301002-001

在线出版日期：2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：132-136