HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立与鉴定

摘要：

目的:采用胰岛素体外诱导法建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型,为研究胰岛素抵抗及2型糖尿病提供一种可靠的体外胰岛素抵抗模型.方法:采用含不同胰岛素浓度的RPMI 1640培养基作用于HepG2细胞,葡萄糖-己糖激酶法检测作用不同时间点培养基中葡萄糖含量,MTT法检测各胰岛素浓度对HepG2细胞存活率的影响,确定胰岛素抵抗最佳作用浓度及时间；并以油红0染色观察细胞形态的变化；Real-time PCR法检测IRS-2 mRNA的表达,酶联免疫法检测葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)的表达.结果:细胞产生胰岛素抵抗的最佳作用时间为36 h,最佳胰岛素浓度为1 × 10-8 mol·L-1.建立模型后鉴定,模型细胞与正常细胞相比脂滴明显增多；IRS-2 mRNA的表达较正常细胞明显降低(P＜0.05),G-6-Pase的表达较正常细胞明显升高(P＜0.05).结论:采用胰岛素体外诱导的方法,在胰岛素浓度为1×10-8mol·L-1,作用36 h后,可建立稳定的HepG2细胞胰岛素抵抗模型.

关键词：HepG2细胞、胰岛素抵抗模型、胰岛素受体底物-2、葡萄糖-6-磷酸酶

所属期刊栏目：19

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：广东省教育厅项目AFD111122A03

在线出版日期：2013-06-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：203-207