肠上皮细胞模型不同培养条件的优化及适应性研究

摘要：

目的:建立肠上皮(Caeo-2)细胞单层模型,探讨不同培养条件对细胞单层模型的影响,优化适宜的条件,提供稳定、重复性好的Caco-2细胞模型.方法:将细胞接种Transwell培养板上进行体外培养,并比较3种Transwell培养板及包被鼠尾胶原蛋白对细胞单层的影响,通过透射电镜和倒置显微镜观察细胞单层的形态学特征,通过测定细胞单层的电阻值、细胞两侧碱性磷酸晦含量、荧光素钠的透过量验证细胞单层的完整性、极性、通透性.结果:经过21 d培养,24孔Transwell培养的细胞单层的完整性、极性高于12孔Transweil培养的细胞单层,而透过性低于12孔Transwell培养的细胞单层;包被鼠尾胶原蛋白的Transwell于细胞单层生长前期跨上皮细胞电阻值(transepithelium electrical resistance,TEER)迅速升高,对细胞单层生长的中后期无显著性影响.结论:3种Transwell均可成功培养Caco-2细胞单层,24孔站立式Transweli适用于样品需求量少、检测灵敏度高的物质,可应用于大量样品的高通量筛选;12孔悬挂式Transwell提供检测的样品量和透过率较大,适于实验室的常规操作和常用仪器的样品需求.

关键词：Caco-2细胞、跨膜电阻、碱性磷酸酶、表观渗透率

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分类号：R285.5(中药学)

资助基金：国家科技支撑计划项目2008BAI151B00;国家科技部科研院所技术开发研究专项2008EG150298;高等学校博士学科点专项科研基金200800231106;国家科技部重大新药创制专项2009ZX09301-003

在线出版日期：2011-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：205-210