急性呼吸道感染患儿人冠状病毒NL63检测与分析
目的 建立人冠状病毒NL63(human coronavirus NL63)的实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)方法,了解呼吸道疾病惠儿感染人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)的情况.方法 收集2008年10月至2009年4月因急性呼吸道感染(ARTI)而就诊于福建医科大学省立临床医学院患儿的咽拭子、鼻咽抽吸物、痰标本共151份,设计多聚酶蛋白1a基因的引物和Taqman探针,扩增1a基因片段,并将其克隆到PMD18-T载体上,构建质粒标准品,建立FQ-PCR检测方法,进行敏感性、特异性试验.扩增核衣壳蛋白N基因,对其序列进行初步分析.结果 所建立的FQ-PCR方法特异性好,线性范围为101~1010 copies/μL,变异系数小于5%.151份临床标本中共检测到2份HCoV-NL63阳性,阳性率为1.3%(2/151).结论 采用FQ-PCR方法可以检测急性呼吸道疾病患儿感染HCoV-NL63的情况.
人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)、急性呼吸道感染(ARTI)、实时荧光定量PCR、N基因
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R72(儿科学)
福建省自然科学基金F0310042
2011-03-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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