人细小病毒B19 VP1蛋白表达及检测特异性抗体临床应用研究
目的 探讨检测人细小病毒B19 IgM和IgG抗体国产试剂的敏感性、特异性以及诊断准确度,探讨其临床应用价值.方法 标本来源为2006年5月至2008年6月第四军医大学西京医院收治的心肌炎、血液病、呼吸道感染等患儿165例,用重组质粒VP1-PQE30,转化大肠埃希菌M15,测序正确后发酵培养,IPIG诱导表达,通过SDS-PAGE及蛋白质印迹分析表达产物,表达蛋白经AKTA explorer 100快速纯化系统纯化.经滴定选择最佳抗原包被浓度及血清最佳稀释度,建立表达蛋白ELISA检测人细小病毒B19抗体方法,探讨其实用性.结果 用表达纯化蛋白抗原建立的ELISA方法与腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、疱疹病毒的抗体阳性血清无交叉反应.其检测B19 IgM和IgG的敏感性分别为87.50%、89.28%,特异性分别为90.34%、90.90%,诊断准确度为97.01%、95.54%.两种方法有较好的一致性.结论 用国产的表达纯化B19病毒VP1蛋白,所建立的表达蛋白ELISA方法,检测人细小病毒B19 IgM、IgG抗体,有较好的敏感性、特异性和诊断准确度.方法方便快捷、成本低,值得进一步深入研究、推广应用.
人细小病毒B19、VP1独特区蛋白、ELISA、原核表达
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R72(儿科学)
国家自然科学基金30571948
2009-12-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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