miR-141基因干扰靶向PTEN影响小鼠BMSCs成骨分化的实验研究

摘要：

目的 探讨微小核糖核酸-141(micro-RNA-141,miR-141)基因干扰靶向蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)对小鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响.方法 取小鼠BMSCs并鉴定;构建miR-141 mimics、miR-141 inhibitor、miR-141 mimics-NC、miR-141 inhibitor-NC质粒,分别转染小鼠BMSCs,并记为过表达组、沉默组、过表达对照组、沉默对照组,另取小鼠BMSCs常规培养记为空白对照组.碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红染色检测各组成骨分化能力;检测各组miR-141、PTEN通路相关基因及蛋白表达;验证miR-141是否可靶向调控PTEN.结果 与空白对照组、过表达对照组相比,过表达组ALP定量,AKT、GSK3βmRNA及蛋白表达,Runx2、Osterix蛋白表达,p-AKT、p-GSK3β 均下降(P<0.05),钙化结节大小、数量、密度均显著减少,miR-141 mRNA表达及PTEN mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05);与空白对照组、沉默对照组相比,沉默组ALP定量,AKT、GSK3βmRNA及蛋白表达,Runx2、Osterix蛋白表达,p-AKT、p-GSK3β 均升高(P<0.05),钙化结节也显著增多,miR-141 mRNA表达及PTEN mRNA和蛋白表达低于其余4组(P<0.05);荧光素酶活性实验验证miR-141可靶向调控PTEN.结论 miR-141过表达可激活PTEN信号通路抑制小鼠BMSCs成骨分化,而miR-141基因沉默可下调PTEN,上调AKT、GSK3β表达,增加p-AKT、p-GSK3β水平,并促进成骨标志蛋白表达,促进小鼠BMSCs成骨分化.

关键词：微小核糖核酸-141、蛋白酪氨酸磷酸酶基因、骨髓间充质干细胞、成骨分化

所属期刊栏目：33

分类号：R-33(医学研究方法)

在线出版日期：2023-06-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：96-103