自噬在慢性肾病血管钙化中的作用研究

摘要：

目的 探索自噬与CKD血管钙化之间的关系,以及自噬在CKD血管钙化中的作用.方法 首先将30只SD大鼠随机分为对照组(Control组,15只)和腺嘌呤及高磷饮食诱导的模型组(CKD组,15只).免疫组化检测主动脉中α-SMA、RUNX2、LC3B及Beclin-1蛋白表达,新鲜主动脉做钙含量测定,进一步做它们之间的相关性分析.再构建β-GP诱导的主动脉平滑肌细胞(aorta smooth muscle cell,ASMC)钙化模型.电镜检测细胞内自噬小体,免疫荧光及Western blot检测LC3B蛋白.自噬抑制剂3-MA及激活剂RAP干预自噬后,采用免疫组化、Western blot检测ASMC中α-SMA、RUNX2蛋白表达变化,茜素红染色及钙含量检测ASMC钙化情况.结果 模型组成功建立CKD血管钙化模型.与对照组相比,模型组主动脉α-SMA蛋白表达下降,RUNX2、LC3B、Beclin-1蛋白表达及钙含量升高.Beclin-1及LC3B蛋白表达分别与主动脉钙含量及RUNX2蛋白表达呈正相关.β-GP诱导ASMC自噬小体增加,LC3B荧光斑点增多,LC3BII蛋白表达增强(P<0.01).RAP激活自噬后减少ASMC钙沉积及钙含量(P<0.05),减少RUNX2蛋白表达(P<0.05),促进α-SMA蛋白表达(P<0.05);3-MA抑制自噬后结果与之相反.结论 CKD血管钙化同时存在自噬激活,自噬在CKD血管钙化中可能具有内源性保护作用,自噬有望成为CKD血管钙化新的治疗靶目标.

关键词：慢性肾病、血管钙化、动脉平滑肌细胞、自噬、成骨样分化

所属期刊栏目：33

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：四川省肾脏疾病临床医学研究中心重点项目2019YFS0537-3

在线出版日期：2023-03-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：51-60