miR-214对异丙酚麻醉大鼠术后神经元损伤的保护作用

摘要：

目的 探讨miR-214对异丙酚麻醉诱导的神经元损伤的保护作用及生物学机制.方法 7日龄SD雄性大鼠随机分为4组(每组15只):生理盐水组(NS)、异丙酚麻醉开腹探查组(模型)、miR-NC组和miR-214组.除NS组外,其余组别建立异丙酚麻醉开腹探查模型.miR-NC组和miR-214组分别在麻醉前将miR-NC-agomir或miR-214-agomir注射到海马内.采用免疫荧光法检测海马mTORC1的表达,TUNEL染色检测海马组织细胞凋亡,RT-qPCR分析海马组织中miR-214表达.分别将miR-214抑制剂和mTORC1抑制剂转染入HT22海马神经元细胞,然后暴露于异丙酚.采用流式细胞术分析细胞的存活情况和Western blot分析TEFB、C-caspase3蛋白表达.结果 与NS组相比,模型组大鼠海马中miR-214明显下调(P<0.05),并且海马神经细胞凋亡显著增加(P<0.05).与模型组相比,miR-214组海马神经元凋亡减弱(P<0.05).生物信息学预测证明mTORC1和miR-214之间存在特异性结合位点.免疫荧光检测显示,与NS组比较,模型组诱导海马神经组织中mTORC1表达增加(P<0.05),miR-214治疗显著降低了mTORC1表达(P<0.05).此外,与NC对照组相比,si-mTORC1转染导致暴露于异丙酚的HT22海马神经元细胞的凋亡率显著降低,并且TFEB表达显著增加(P<0.01),以及C-caspase3降低(P<0.05).而miR-214抑制剂转染显著逆转了si-mTORC1的保护作用以及诱导的TFEB、C-caspase3蛋白表达的变化(P<0.05).结论 miR-214可能通过mTORC1-TFEB通路减轻异丙酚神经毒性,提高神经元的存活率.

关键词：miR-214、异丙酚、开腹探查、大鼠、神经元、mTORC1-TFEB通路

所属期刊栏目：32

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：四川省卫生适宜技术推广项目19SYJS56

在线出版日期：2022-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：39-46,81