基于NOS通路探讨DAHP对脑外伤大鼠的神经保护作用

摘要：

目的 探究2,4-二胺-6-羟基嘧啶(DAHP)对脑外伤大鼠的神经保护作用,初步探究其可能的作用机制.方法 采用Feeney法制备脑外伤大鼠模型,将造模成功的SD大鼠随机分为模型组、DAHP组、NOS激活剂组(四氢生物蝶呤(BH4)组))、DAHP+BH4组,每组12只,另选取12只大鼠仅打开骨窗不采取打击器打击作为假手术组.造模后2 h,DAHP组尾静脉注射0.5 g/kg的DAHP,BH4组尾静脉注射0.3 mg/kg的BH4,DAHP+BH4组尾静脉注射0.5 g/kg的DAHP与0.3 mg/kg的BH4,假手术组、模型组均注射等量生理盐水,注射体积均为10 mL/kg,每天给药1次,连续处理1周.末次处理后,采用定位航行、空间探索实验评估大鼠行为学;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脑组织形态学变化;Tunel染色观察脑组织细胞凋亡;Griess法检测脑组织一氧化氮(NO)水平;免疫印迹法检测大鼠脑组织中神经型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧化酶-2(COX-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达情况.结果 假手术组脑组织神经细胞形态正常,细胞核着色均匀;模型组神经细胞发生肿胀、变形、细胞核固缩,伴有炎性细胞浸润;与模型组相比,DAHP组神经细胞组织形态得到一定缓解,炎性浸润程度减轻,BH4组坏死神经细胞数量增多,损伤程度加重,DAHP+BH4组细胞形态变化不显著.与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期延长,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白降低,脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).与模型组相比,DAHP组大鼠逃避潜伏期缩短,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白升高,脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05).与模型组相比,BH4组大鼠逃避潜伏期延长,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白降低,脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05).DAHP+BH4组大鼠逃避潜伏期、脑组织细胞凋亡率、nNOS、iNOS蛋白表达、NO水平、NF-κB、TNF-α、COX-2、Caspase-3蛋白表达低于BH4组,空间探索时间比例、脑组织Bcl-2蛋白表达高于BH4组(P<0.05).结论 DAHP可缓解脑外伤大鼠神经功能损伤,减轻脑组织神经细胞凋亡,其机制可能与抑制iNOS信号通路有关.

关键词：脑外伤;神经损伤;2,4-二胺-6-羟基嘧啶;一氧化氮合酶;一氧化氮

所属期刊栏目：31

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：河南省医学科技攻关计划项目202002149

在线出版日期：2022-01-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：35-42