Hpd基因修饰制备高酪氨酸血症Ⅲ型巴马小型猪模型

摘要：

目的 利用CRISPR/Cas9技术敲除巴马小型猪4-羟基苯丙酮酸氧化酶(4-OH phenylpyruvate dioxygenase,4HPPD/HPD)制备高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型.方法 分别从质粒pGL3-U6-gRNA-PGK-puromycin和pST1374-NLS-flag-linker-Cas9中通过PCR扩增sgRNA-Hpd和Cas9体外转录用模板,接着体外转录出Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd,最后将Cas9 mRNA和sgRNA-Hpd共注射入巴马小型猪受精卵的胞质内,以制备Hpd基因敲除巴马小型猪.结果 胞质内共注射后,共移植20枚受精卵至2只代孕母猪.获得子代Hpd基因敲除巴马小型猪共4只.结论 本研究成功制备了高酪氨酸血症III型巴马小型猪模型,将为研究酪氨酸代谢通路提供更好的模型.

关键词：4-羟基苯丙酮酸氧化酶、CRISPR/Cas9、高酪氨酸血症Ⅲ型、巴马小型猪

所属期刊栏目：29

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：广东省科技计划项目2013B060300013,2010A011200003,2016A020208004;国家自然科学基金项目31271042;国家科技部国际合作项目2011DFA33290;江门市创新团队项目2017TD023290;广州市科技计划项目201704020012;南方医科大学科研启动计划项目PY2017N032

在线出版日期：2019-06-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：11-16