树鼩腺病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

目的 通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒.方法 根据TAV全基因组3'端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.结果 建立的TAV实时荧光定量PCR检测方法特异性好,与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应;方法的最低检测限度为每微升3.7拷贝,灵敏性强;相关检测系数R2为0.998,扩增效率为95.7%;扩增结果具有良好的线性关系,且重复性检测效果好.结论 成功建立了TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,灵敏度高,重复性好,可用于TAV感染的早期快速检测.

关键词：树鼩腺病毒、3’保守区域、TaqMan、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：28

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：国家科技支撑计划2014BAI01B00;云南省联合支持国家计划项目2015GA009;云南省科技人才和平台计划项目2017HC019

在线出版日期：2018-05-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：72-77