10.3969.j.issn.1671-7856.2017.06.006
miR-214通过靶向调控E2F3抑制肝癌细胞的增殖
目的 探讨miR-214通过靶向调控E2F转录因子3(E2F3)抑制肝癌细胞的增殖.方法 RT-PCR法检测细胞株SMMC-7721、HepG2、SK-Hep-1和Huh 7中miR-214的表达量,并利用脂质体转染miR-214 NC及miR-214 mimics.采用MTT法检测miR-214对肝癌细胞活力的影响;Hoechst染色试剂盒检测miR-214对细胞凋亡的影响,流式细胞术检测miR-214对细胞周期的影响;Western blot及RT-PCR法检测miR-214对肝癌细胞中E2F3蛋白及mRNA表达量的影响,并通过荧光素酶报告基因进行验证.结果 SMMC-7721、SK-Hep-1、Huh 7及HepG2中miR-214的表达量分别为(0.83±0.08)、(0.32±0.03)、(0.33±0.03)、(0.08±0.01),其中HepG2中miR-214表达量最低,因此选用HepG2作为后续实验细胞株.HepG2细胞转染miR-214 NC及miR-214 mimics、miR-214 mimics组中miR-214表达量(0.65±0.06)明显高于miR-214 NC组(0.14±0.01),miR-214 mimics组细胞活力(0.35±0.03)明显低于miR-214 NC组(0.69±0.06),miR-214 mimics组细胞凋亡率(36.37±3.43)%明显高于miR-214 NC组(3.74±0.34)%,miR-214 mimics组G1期明(57.79±5.78)显长于miR-214 NC组(45.319±4.53),miR-214 mimics组中E2F3蛋白[(0.23±0.02)、(0.24±0.02)]及mRNA表达量明显低于miR-214 NC组[(0.98±0.09)、(0.99±0.10)],差异均具有统计学意义(P<0.01).结论 miR-214过表达能通过下调E2F3表达抑制肝癌细胞的增殖.
miR-214、肝癌细胞、E2F3、增殖
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R-33(医学研究方法)
2017-07-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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