人IL-37b在大肠埃希菌中的表达、纯化及活性鉴定

摘要：

目的 表达重组IL-37b蛋白并去除内毒素,鉴定其活性.方法 构建原核表达载体pET28/IL-37b,转化大肠杆菌感受态细胞;经IPTG诱导表达的重组蛋白由Ni2+-NTA凝胶进行变性条件下的亲和层析纯化;用SDS-PAGE分析、考马斯亮蓝染色鉴定重组蛋白是否为目的蛋白;去除蛋白中原核表达所产生的内毒素;将蛋白作用于受LPS刺激的RAW 264.7细胞,收集培养上清,通过ELISA方法检测IL-6的表达水平,鉴定蛋白的生物学活性.结果 表达了纯度较好的重组IL-37b蛋白,降低了其中原核表达所产生的内毒素,经鉴定其具备良好的生物学活性.结论 成功表达了具备良好生物学活性的IL-37b蛋白.

关键词：IL-37b、表达、纯化、生物学活性

所属期刊栏目：27

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费

在线出版日期：2017-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：20-24