10.3969/j.issn.1671-7856.2016.04.011
改良的乳小鼠心肌细胞原代培养方法
目的:建立一种稳定而快速的乳小鼠心肌细胞的原代培养方法。方法用多聚赖氨酸预包被处理培养皿,采用两步法(0.25%胰酶4℃过夜,0.5 mg/mL-1.0 mg/mL II型胶原酶+5 mg/mL白蛋白的胶原消化液37℃短时多次消化),通过差速贴壁70 min +5-溴脱氧尿嘧啶的使用来纯化心肌细胞。倒置相差显微镜下观察心肌细胞形态变化,台盼蓝染色法检测细胞存活率,α-actinin特异性免疫荧光染色鉴定心肌细胞并计算纯度。结果心肌细胞形态良好,自发搏动,细胞成活率可达到98%,纯度可达到95%。结论本方法培养的心肌细胞存活率高,纯度高,是一种理想的心肌细胞原代培养方法。
乳小鼠、心肌细胞、原代培养
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R-33(医学研究方法)
国家自然科学基金编号31300946,31260250;沪州市人民政府-沪州医学院科技战略合作科技项目2013LZLY-J22。
2016-05-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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