I型鸭肝炎病毒 TaqMan 荧光定量 RT－PCR 方法的建立及初步应用

摘要：

目的：建立快速诊断I型鸭肝炎病毒的荧光定量RT－PCR方法。方法根据NCBI下载的20个来自我国不同省份的的I型鸭肝炎病毒的基因序列，找出其保守序列，设计合成一对引物和一条TaqMan探针，进行条件优化，检测其特异性，敏感性，稳定性。结果该方法敏感性达20拷贝，比常规PCR敏感性高。其特异性强，对番鸭细小病毒（MDPV），鹅细小病毒（GPV），新城疫病毒（NDV）和禽流感（AIV），鸭减蛋综合征病毒（EDSV），禽网状内皮组织增生症病毒（REV），鸭坦布苏病毒（DTMUV），禽呼肠弧病毒（ARV）8种病毒的检测均为阴性，I型鸭肝炎病毒检测结果为阳性。用建立的方法检测了江苏徐州采集100份样品，阳性率为92％。说明I型鸭肝炎病毒在江苏徐州地区的鸭群中普遍存在。结论建立了I型鸭肝炎病毒荧光定量PCR方法。

关键词：I型鸭肝炎病毒、荧光定量、RT-PCR、应用

分类号：R-33(医学研究方法)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项No．0302015013；中国农业科学院科技创新工程创新经费No．2015118。

在线出版日期：2016-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：71-74,80