荧光定量 PCR 与半定量 PCR 检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶／氧化酶基因的mRNA 表达差异的比较

摘要：

目的：比较荧光定量PCR 与半定量PCR 检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中黄嘌呤脱氢酶氧化酶（ XDH／XO）的mRNA的相对表达量的差异，为改进实验研究方法学提供参考依据。方法提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中总RNA，使用相同的引物序列及内参基因，分别用荧光定量PCR与半定量PCR进行相对定量检测，结果做比对分析。结果两种检测方法均能检测到健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中XDH／XO的mRNA表达，荧光定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织0．4ng总RNA中的XDH／XO的mRNA表达，半定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织15．625 ng总RNA中的XDH／XO的mRNA表达，荧光定量PCR较半定量灵敏度高39倍。两种方法检测结果均显示猕猴不同组织XDH／XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高，对于表达量较低的其他组织，荧光定量PCR与半定量PCR检测结果存在有一定差异。结论两种方法均可用于检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶（ XDH／XO）的mRNA的相对表达量，荧光实时定量PCR灵敏度较高于半定量PCR法。

关键词：荧光定量PCR、半定量PCR、黄嘌呤脱氢酶氧化酶、mRNA表达、猕猴、肝、心、肾、睾丸、皮肤

分类号：R-33(医学研究方法)

在线出版日期：2016-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：47-53