10.3969/j.issn.1671.7856.2015.006.007
靶向脐带间充质干细胞的构建及其在小鼠脾脏内的定位
目的:构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体,用携带P1-GFP融合基因的慢病毒感染MSC,使MSC具有靶向性,将靶向MSC注入小鼠体内后观察MSC在小鼠脾脏的定位及与淋巴细胞的关系。方法用组织片贴壁法培养健康人脐带间充质干细胞,用基因工程技术构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体并感染人脐带间充质干细胞,通过尾静脉将转入P1-GFP融合基因的MSC注入小鼠体内,18 h后免疫组化染色观察GFP在小鼠脾脏的定位。结果培养的健康人脐带间充质干细胞生长良好, MSC感染含P1-GFP融合基因的慢病毒18 h后MSC开始出现绿色荧光,随着培养时间的延长,荧光强度逐渐增强,72 h达高峰。靶向MSC表达髓系干细胞的表面标记CD105(90.0%)/CD44(98%),CD73(85.0%)/CD90(98.5%)。将靶向MSC经尾静脉注入小鼠体内,18 h后小鼠脾脏出现大量GFP阳性细胞,并与脾脏淋巴细胞密切接触。结论本研究成功构建了含P1-GFP融合基因的靶向MSC,靶向MSC成功定向脾脏,并与脾脏淋巴细胞密切接触,可用于后续的实验研究。
靶向、脐带间充质干细胞、慢病毒、脾脏
R-33(医学研究方法)
国家自然科学基金30872394;海军总医院创新培育基金资助CXPY201312。
2015-07-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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