应用 TALEN 技术敲除 gata4基因建立斑马鱼先天性心脏病模型

摘要：

目的：人工构建TALEN靶向敲除载体敲除gata4基因，建立斑马鱼先天性心脏病动物模型。方法采用单元组装法构建靶向敲除gata4基因的载体，将其体外转录成TALEN mRNAs，通过显微注射的方式注入单细胞期受精卵中，胚胎检测TALEN的敲除效率，再通过剪尾、酶切、测序筛选发生基因突变的斑马鱼及突变的类型。结果酶切、测序结果证实成功构建出正确的 gata4靶向敲除载体，注入斑马鱼受精卵中，发生基因敲除的效率为35．18％，通过剪尾、PCR、酶切检测成功地筛选出了发生基因突变的斑马鱼，测序结果显示出不同种类的gata4基因突变。结论成功构建gata4基因敲除的斑马鱼动物模型，为进一步研究人类gata4基因突变引起先天性心脏病的发病机制提供了良好的动物模型。

关键词：TALEN、gata4基因、斑马鱼、模型、动物、先天性心脏病

分类号：R33(人体生理学)

资助基金：中央级公益性科研院所基本科研业务专项资金项目－优秀青年科技人才创业基金项目编号2012GJSSJKC02；国家十二五科技支撑计划计划生育技术安全性评价标准化实验动物培育关键性共享技术研究项目编号2012BA131B06。

在线出版日期：2015-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-7,13