高保真酶特异性检测大鼠SNP基因型新方法

摘要：

目的 应用高保真酶(Pfu)和3'末端修饰引物在单管双向等位基因特异性扩增(SB-ASA)中区分SNP基因型,建立高保真酶特异性检测SNP基因型的新方法.方法 选取近交系大鼠SNP位点,以RS8149053为例,设计两个外部引物和两个等位基因特异性引物,四引物3'末端进行硫代磷酸化修饰,应用高保真聚合酶(Pfu)进行特异性扩增,扩增结果测序验证其可靠性.结果 在RS8149053 SNP位点(C/T)上,等位基因型CC扩增出179 bp目的片段,基因型TT扩增出597 bp目的片段,基因型不同则扩增出分子量不同的片段,目的条带测序结果与Rat Genome Database数据库基因型结果一致,高保真酶扩增结果稳定且特异性强.结论 高保真酶等位基因特异性扩增技术能有效降低假阳性率,是一种快速、特异的SNP基因分型新方法.

关键词：高保真酶、SNP基因分型、硫代磷酸化修饰引物

所属期刊栏目：21

分类号：R33(人体生理学)

在线出版日期：2011-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：69-73