C57BL/6J小鼠脂肪组织总RNA提取及周脂素基因的克隆

摘要：

目的 用改进后的方法提取高质量的RNA,以此为模板,应用T-A克隆法克隆C57BL/6J小鼠周脂素基因编码区,对其进行测序验证,并与GenBank比对.方法 在试剂说明书基础上,改进提取脂肪组织RNA的方法,从C57BL/6J附睾脂肪组织提取高质量的总RNA,用RT-PCR扩增出周脂素编码区基因,并将目的基因编码区克隆入pMD18-T载体中,转化E-coli JM109后,筛选阳性克隆,通过限制性内切酶酶切鉴定后,对其进行测序验证,并与GenBank比对.结果 用改进后的方法成功提取出了高质量的总RNA,并且成功提取构建的重组载体中含有周脂素基因的全长序列,与GenBank公布的序列一致.结论 改进的后的脂肪组织RNA提取方法是可行的,并获得周脂素基因的cDNA.为进一步研究其生物学功能奠定了基础.

关键词：RNA提取、周脂素、RT-PCR、基因克隆、序列分析

所属期刊栏目：21

分类号：Q781;R33(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：35-39