小鼠胚胎成纤维细胞的分离、扩增和抑制

摘要：

目的建立有效的胚胎成纤维细胞饲养层体系,用于分离和克隆胚胎干细胞研究.方法取胎鼠组织制备小鼠原代成纤维细胞,观察不同分离和培养条件对细胞增殖的影响,以及丝裂霉素C对细胞增殖的抑制作用;细胞增殖的数量用MTT法测定.结果分离小鼠胚胎原代成纤维细胞的最适胎龄是12.5～14.5 d;20℃～25℃时,用0.25%胰蛋白酶消化组织的最佳时间为3 mi n;可在培养3～6 d后进行传代.细胞冻存于-80℃3～4个月,复苏后能正常传代.丝裂霉素C 抑制胚胎成纤维细胞增殖的合适浓度为每毫升20 μg/105细胞,作用2～4 h,可维持小鼠原代胚胎成纤维细胞9 d内不增殖也不死亡.结论在合适条件下,小鼠原代胚胎成纤维细胞能顺利分离和培养,并能多次传代和冻存;经丝裂霉素C处理后增殖受抑制,可作为饲养层细胞用于胚胎干细胞的研究.

关键词：小鼠、胚胎、成纤维细胞、胚胎干细胞

所属期刊栏目：12

分类号：Q952(动物学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：215-219