泰泽菌PCR检测方法的建立及初步应用

摘要：

目的建立和应用泰泽菌巢式PCR检测方法.方法参照日本学者Goto 检测泰泽菌16S rDNA序列设计的两对引物, 对PCR的检测条件进行了改进和优化.结果巢式PCR反应的外引物能引导扩增出一条625!bp的DNA片段,内引物则能引导扩增出一条196!bp的 DNA片段.此625!bp和196!bpDNA片段的大小均与 Goto 报道的结果完全一致.试验证明196!bp的阳性带为泰泽菌16S rDNA特异性保守片段.通过将泰泽菌阳性肝组织标本经系列稀释的试验表明,该PCR方法的检测灵敏度为2个菌.另外,将阳性对照标本扩增的625!bp DNA片段作核酸序列测定,发现其碱基序列与 Goto 报道的泰泽菌MSK株及RJ株16S rDNA 序列均有99%同源性.结论根据上述结果,我们应用本方法对普通级小鼠、大鼠、金黄色地鼠肝组织标本各5份、普通级豚鼠肝组织标本10份、沙鼠肝组织标本10份、MHV3感染的小鼠肝组织1份进行了初步检测,结果未发现带菌动物.

关键词：泰泽菌、聚合酶链反应

所属期刊栏目：11

分类号：Q93-332(微生物学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：224-227