β-glucan诱导训练免疫及其在逆转免疫耐受中的应用

摘要：

目的 本研究拟通过在体内和体外诱导训练免疫反应,以探讨诱导训练免疫是否可能逆转免疫耐受状态.方法 以 β-glucan作为训练免疫诱导剂,建立体外小鼠胫骨来源的巨噬细胞(bone marrow derived-macrophages,BMDM)训练免疫模型:40μg/mLβ-glucan刺激BMDM 24 h,随后用PBS洗涤后让BMDM在完全培养基中静息6 d,在第3天的时候补充培养基,第7天收集细胞100 ng/mL LPS再刺激,4 h后收集细胞抽提RNA和24 h后收集细胞上清;建立β-glucan体内训练免疫模型:野生型C57BL/6J腹腔注射1 mgβ-glucan,对照组腹腔注射200μL的PBS,7 d后感染金黄色葡萄球菌(每只1×104/200μL PBS).LPS诱导体外免疫耐受,体外免疫耐受逆转通过在耐受的BMDM中加入40μg/mLβ-glucan刺激24 h,随后让细胞静息1 d,通过促炎因子的恢复水平来反映耐受逆转情况.盲肠结扎穿刺(cecal ligation and puncture,CLP)诱导体内免疫耐受,体内免疫耐受逆转通过向CLP组腹腔注射1 mgβ-glucan,通过再次感染非致死剂量的细菌或真菌的生存率反映耐受逆转情况.结果(1)经过β-glucan训练的BMDM,在LPS再次刺激时产生更高水平的促炎因子TNF-α、IL-6和NO.同时,β-glucan训练的BMDM通过激活m-TOR信号通路,导致细胞代谢模式向糖酵解转变,引起细胞内乳酸增多;(2)β-glucan诱导的体内训练免疫具有保护作用;(3)β-glucan在体外能够逆转LPS诱导的免疫耐受,恢复BMDM促炎细胞因子的产生;(4)目前我们的结果尚未证实β-glucan在体内可以逆转CLP诱导的免疫耐受.结论 本研究成功地建立了β-glucan体外和体内训练免疫模型,并证明了在体外β-glucan能逆转LPS诱导的免疫耐受,但是目前结果尚未证实β-glucan在体内能够逆转CLP诱导的免疫耐受,提高二次感染生存率.

关键词：β-葡聚糖、训练免疫、CLP、免疫耐受、耐受逆转

所属期刊栏目：30

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：国家自然科学基金32070904

在线出版日期：2023-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1013-1022