肾原位抑制miR-146b-5p表达改善UUO小鼠肾纤维化

摘要：

目的 明确miR-146b-5p在小鼠肾纤维化模型中的表达情况,并探讨体内敲低miR-146b-5p对小鼠肾损伤及纤维化的影响.方法 将24只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为假手术组(sham),UUO模型组(UUO),UUO+肾miR-146b-5p电转敲低组(UUO-KD),每组8只.Sham组仅切开皮肤,暴露且游离右侧肾输尿管,不做结扎或离断处理.UUO组,行单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型.UUO-KD组通过先电转CRISPR/RfxCas13 d质粒于小鼠肾进行特异性miR-146b-5p敲低,24 h后按模型组方法建立UUO小鼠模型,7 d后处死小鼠收集肾标本.HE染色观察肾病理变化,Masson检测肾间质纤维化程度,免疫组化检测纤维化相关蛋白(α-SMA、FN、Col-1)表达,Western Blot、Real-time PCR检测miR-146b-5p、α-SMA、FN、IL-1β、IL-6、TNF-α 等基因的变化.结果 miR-146b-5p在UUO模型中显著升高,电转敲低miR-146b-5p后该基因显著下降(P<0.05),同时,IL-1、IL-6、TNF-α等炎性因子表达出现显著下调(P<0.05)经HE、Masson染色后观察到,UUO-KD组较UUO组相比肾结构良好,肾小管变形轻微,肾损伤及纤维化程度均明显改善.且免疫组化结果发现:α-SMA、FN、Col-1等纤维化指标在UUO-KD组也显著降低(P<0.0001).结论 抑制UUO中高表达的miR-146b-5p可明显改善肾纤维化,miR-146b-5p可能是肾纤维化的一个潜在治疗靶标.

关键词：miR-146b-5p、靶向电转敲低技术、肾纤维化、慢性肾疾病

所属期刊栏目：30

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：四川省科技厅项目;四川省科技厅项目;西南医科大学校级项目;西南医科大学校级项目

在线出版日期：2023-02-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：927-934