10.3969/j.issn.1005-4847.2022.05.008
布鲁氏菌外膜蛋白OMP25诱导BALB/c小鼠免疫反应的分析
目的 本研究旨在分析布鲁氏菌外膜蛋白OMP25诱导机体产生的免疫反应.方法 采用PCR方法扩增羊种布鲁氏菌16M的omp25基因,克隆至pET-32a质粒.重组质粒pET32a-OMP25转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,并诱导表达.利用Ni2+柱纯化试剂盒进行蛋白纯化.用纯化的重组蛋白(rOMP25)和Rev.1疫苗株免疫小鼠,检测小鼠脾细胞中IFN-γ和IL-2的水平,以及小鼠血清中IgG抗体和抗炎因子IL-10水平,并用Western Blot检测反应原性.结果 (1)omp25基因大小为642 bp,编码214个氨基酸,rOMP25大约在40.8×103 处出现蛋白条带,纯化后为单一条带.(2)用t检验方法统计显示,rOMP25免疫小鼠后,诱导脾细胞产生IFN-γ和IL-2的水平,小鼠血清中IgG和IL-10的水平与Rev.1组相似,显著高于对照组(P<0.01).(3)Western Blot检测结果显示,rOMP25具有较好的反应原性.结论 rOMP25具有较好的免疫原性和反应原性,为进一步研究OMP25蛋白的功能,以及研制相关疫苗提供了生物材料.
布鲁氏菌、OMP25、免疫
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Q95-33(动物学)
河南省高等学校重点科研项目;河南省重点研发与推广专项科技攻关项目
2022-11-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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655-661