10.3969/j.issn.1005-4847.2022.02.011
人血管紧张素转化酶2(ACE2)BAC转基因小鼠模型的制备及鉴定
目的 期望获得含有全长hACE2基因序列的hACE2人源化小鼠模型,为心血管疾病、新冠肺炎发病机制研究、药物与疫苗研发提供重要工具.方法 将纯化含有hACE2完整编码序列的BAC质粒,利用小鼠受精卵显微注射和输卵管移植技术获得多个首建鼠,分别育种建系,通过杂交育种获得稳定遗传F2代小鼠品系,进一步对F2代小鼠hACE2基因整合、基因拷贝数、相对荧光定量PCR、Western Blot和免疫荧光进行分析.结果 育种获得hACE2-6-9、hACE2-14-3、hACE2-15-1和hACE2-15-2共4个小鼠品系.基因整合结果显示,hACE2-6-9、hACE2-15-1和hACE2-15-2小鼠品系含有完整的hACE2基因座位点及较长的基因调控区,hACE2-14-3含有完整的hACE2基因座位点及3'UTR较短的基因调控区.相对荧光定量PCR和Western Blot检测结果显示,hACE2-6-9、hACE2-15-1和hACE2-15-2品系小鼠肠道中hACE2 mRNA和蛋白表达水平较低,而整合较短调控序列的hACE2-14-3小鼠品系则表达水平较高.免疫荧光染色结果显示hACE2-15-1品系小鼠肾小管和肺血管内皮细胞中均有hACE2表达.结论 获得了含有全长基因序列的hACE2人源化BAC转基因小鼠,保留完整的hACE2启动子及基因调控区,从而为心血管疾病、新冠肺炎发病机制研究、hACE2基因表达调控机制研究和药物、疫苗的研发提供重要工具.
ACE2、人源化小鼠、细菌人工染色体、基因表达
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Q95-33(动物学)
国家十三五传染病重大专项;国家十三五传染病重大专项;上海科委平台提升项目;上海市公共卫生临床中心院内项目;上海市公共卫生临床中心院内项目;上海市公共卫生临床中心院内项目
2022-06-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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