利用CRISPR-Cas9敲除Tyr基因制作 白化C57BL/6N小鼠

摘要：

目的 为了获得白化的C57BL/6N小鼠,扩大其在皮肤移植和胚胎干细胞方面研究中的应用.方法 通过体外设计合成Cas9 mRNA和系列sgRNA(single guide RNAs),注射到小鼠的受精卵内,破坏合成C57BL/6N小鼠黑色素生成必须的酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)基因序列的第1和第2外显子,产生基因突变,获得F0代白化的C57BL/6N小鼠,然后经过重复回交和自交,形成白化C57BL/6N小鼠近交系.结果 经过注射两对sgRNA,成功的获得了F0代的白化小鼠,在Tyr基因的第1和第2外显子中均发生了缺失突变,小鼠可以将突变基因传递给后代,并在其后代中产生了纯合的白色C57BL/6N小鼠,最后对白化小鼠突变类型进行了分析.结论 通过CRISPR-Cas9技术破坏了小鼠Tyr基因,成功地建立了白化C57BL/6N小鼠近交系,为将来的嵌合体制作、组织移植提供了新的研究工具.

关键词：白化、Tyr、基因敲除、CRISPR-Cas9、C57BL/6N、小鼠

所属期刊栏目：27

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：国家重点研发计划2016YFC1304805;上海市科研计划项目15140901700

在线出版日期：2019-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：493-500