猴免疫缺陷病毒抗体免疫梳检测方法的建立及应用

摘要：

目的 以基因工程技术制备猴免疫缺陷病毒(SIV)的 SIV30蛋白作为抗原诊断试剂,建立免疫梳方法(IC)用于特异性检测实验猴血清中抗SIV的抗体IgG.方法 应用原核表达载体pGEX-4T-1构建SIV SIV30基因的重组表达质粒,并在感受态细胞BL21中表达,将该重组蛋白纯化后作为诊断抗原,建立免疫梳标准化检测程序,并应用于临床检测.结果 最佳抗原包被量为0.02 mg/mL;制备好的IC均能够特异性检测到相应的SIV阳性血清而不与其他病毒血清间发生交叉反应,表明该检测方法特异性强;敏感性分析结果表明,SIV30蛋白能够敏感地检测到1:400倍稀释的SIV阳性血清;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测3次,变异系数(CV)均小于10%;利用该检测方法在对10份可疑猴血清样品进行检测,IC与ELISA检测结果一致率为100.0%,Kappa=1.000.结论 原核表达了SIV30蛋白,制备了IC,并应用于临床检测.该检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,具有良好的实用性.

关键词：猴免疫缺陷病毒、SIV30蛋白、免疫梳、快速检测方法、抗体

所属期刊栏目：26

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：国家质检总局科技项目2013IK031,2013IK051,2015IK089;福建省科技计划重点项目2014N0001;海南省应用技术研究与开发专项项目ZDXM20130025;广东检验检疫局科技计划项目No.2011GDK44,No.2013GDK04.Funded by Science and Technology Project of AQSIQ2013IK031,2013IK051,2015IK089;Key Projects of Science and Technology Plan of Fujian Province2014N0001;Special Project on Applied Technology Research and Development in Hainan ProvinceZDXM20130025;Science and Technology Project of Guangdong Inspection and Quarantine Bureau2011GDK44,2013GDK04

在线出版日期：2018-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：217-223