免疫磁珠分离技术联合流式细胞术检测ENU致大鼠体内Pig-a基因突变

摘要：

目的 结合免疫磁珠分离技术和流式细胞术两种方法,对大鼠外周血突变型红细胞进行富集和检测,优化大鼠外周血Pig-a基因突变试验方法.方法 用20、40和80 mg/(kg·bw)剂量的N-乙基-N-亚硝基脲(N-ethyl-N-nitrosourea,ENU)连续3 d给予SD大鼠,在染毒前、染毒后第7、14和28天分别采集大鼠外周血,经免疫磁性分离柱富集RETCD59-和RBCCD59-,用流式细胞术分别对免疫磁珠分离柱前和柱后的外周血红细胞进行计数.结果 与对照组相比,ENU各剂量组的RETCD59-和RBCCD59-发生率均显著升高(P <0.05);采用免疫磁珠分离技术后,可以在3 min内完成一个样品的Pig-a 基因突变检测,分析的RETCD59-或RBCCD59-细胞数量分别最高可达2× 104个或9×104个.结论 本研究联合运用免疫磁珠分离术和流式细胞术,建立并优化了大鼠体内Pig-a基因突变试验方法,实现了高通量检测,提高了试验的准确性和效率.

关键词：Pig-a基因突变、免疫磁珠分离、流式细胞术、N-乙基-N-亚硝基脲、大鼠、外周血红细胞

所属期刊栏目：26

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：深圳市科技计划项目No.JCYJ20140418153354413.Funded by Shenzhen Science and Technology Planning ProjectJCYJ20140418153354413

在线出版日期：2018-06-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：211-216