斑马鱼sat1．a突变体的鉴定

摘要：

目的：在我们的前期研究工作中，通过Tol2转座子介导的插入突变，筛选到了一批组织特异性表达绿色荧光蛋白GFP的斑马鱼品系。其中一个品系Tol2：20141221t的GFP在神经系统中表达，但还没有鉴定到Tol2转座子插入到基因组什么位置，造成了哪个基因的突变。本文的主要研究目标就是对这一由Tol2转座子插入诱导的斑马鱼突变品系进行鉴定。方法使用交错式热不对称PCR（ thermal asymmetric interlaced PCR， TAIL?PCR）鉴定Tol2转座子插入的基因组位置；利用原位杂交检测被突变的基因的时空表达是否与该品系GFP表达具有一致性；筛选鉴定纯合体突变体，并进一步分析该基因突变造成的发育缺陷。结果在该品系中，Tol2转座子插入到了亚精胺／精胺N1?乙酰基转移酶1a（ spermidine／spermine N1?acetyltransferase 1a， sat1．a）的第八个内含子区域，致使sat1．a基因转录提前终止。我们筛选到了sat1．a纯合突变体，但是没有检测到明显的发育缺陷。结论筛选鉴定的Tol2转座子介导的斑马鱼sat1．a突变体没有明显的发育缺陷，但可以作为研究神经系统发育的有力工具。

关键词：斑马鱼、Tol2转座子、sat1.a、神经系统、原位杂交

所属期刊栏目：24

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目No．31271532资助。

在线出版日期：2017-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：551-557