恒河猴 P21基因在 COS－7细胞中沉默位点的验证

摘要：

目的：在细胞水平筛选恒河猴 P21基因的有效沉默靶点。方法检测 COS－7中 P21基因的表达水平；设计shRNA并构建P21－RNA干扰慢病毒载体FUGW－TDT－P21shRNA转染COS－7细胞，通过real－time PCR检测沉默效率，并以Western blot 在蛋白水平进行验证。结果筛选到四个有效的靶位，分别位于P21 mRNA的541－561、542－562、215－239、624－648 bp。四个靶位点在 mRNA 水平的沉默效率分别为（91．82±3．21）％、（82．47±2．48）％、（81．31±2．69）％和（87．35±4．59）％。相应的蛋白表达量为（11．97±0．70）％、（20．22±0．65）％、（23．21±0．63）％和（14．42±0．86）％。结论在细胞水平筛选得到四个有效的P21基因沉默靶点，可用于恒河猴基因沉默研究。

关键词：基因沉默、P21基因、恒河猴

分类号：R743.31;Q95-33(神经病学与精神病学)

资助基金：国家科技支撑计划No．2014BAI03B01。

在线出版日期：2015-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：297-300