反向斑点杂交检测泰泽病原体

摘要：

目的：建立一种简洁稳定、特异灵敏的检测泰泽病原体（ Tyzzer ’ s organism ）的反向斑点杂交方法（reverse dot blot， RDB）。方法根据泰泽病原体16S rDNA保守基因组序列设计引物和特异性探针，上游引物用生物素标记，进行PCR扩增，建立反向斑点杂交方法，用此法进行了特异性和灵敏度实验，同时，用RDB、ELISA和IFA对41只小鼠、38只大鼠进行了检测。结果 RDB特异性强，最低检测限为4.5 ng／μL。对79例实验动物的检测中，与ELISA检测结果一致性为100％，阳性率是7.59％（6／79）；与IFA一致性为92.4％（73／79），IFA阳性率是0％。结论建立了PCR扩增与分子杂交相结合的准确、灵敏、特异的泰泽病原体反向斑点杂交检测方法。

关键词：泰泽病原体、反向斑点杂交、实验动物

分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：重庆市科委科技创新能力建设项目《重庆市啮齿类实验动物工程技术研究中心》CSTC，2010CB5013。

在线出版日期：2014-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：72-77