长爪沙鼠肝细胞体外分离培养体系的建立

摘要：

目的 建立长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系.方法 以雄性长爪沙鼠为供体,采用组织消化法和Seglen两步灌流法分离肝细胞,以台盼蓝染色检测细胞得率和活率,过碘酸-希夫氏反应(PAS)鉴定肝细胞,倒置显微镜观察肝细胞形态变化,并使用含有多种细胞因子的培养基维持培养.结果 组织消化法和Seglen两步灌流法平均每只长爪沙鼠可分别获得肝细胞(1.33±0.34)×107个、(3.97±1.15)×107个,细胞活率分别为(29.4±6.05)%、(80.3±4.56)%,这两种方法在细胞得率及活率方面存在显著差异.肝细胞内因有大量的糖原颗粒,经PAS染色后被染成红色.结果 表明肝细胞在贴壁后72h内,肝细胞形态发生显著变化.结论 采用胶原酶经肝门静脉灌流分离肝细胞是一种高效获得肝细胞的方法.各种细胞因子有利于维持肝细胞在体外的生长分化,长爪沙鼠原代肝细胞分离培养体系的建立将为肝脏相关疾病研究和防治药物的开发提供技术支持.

关键词：长爪沙鼠、肝细胞、分离、培养

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分类号：Q95-33(动物学)

资助基金：国家自然科学基金项目31000985;国家科技支撑计划重点项目2011BAI15B01-31

在线出版日期：2013-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：15-18,后插5-后插6