10.3969/j.issn.1005-4847.2013.05.003
原代培养大鼠前列腺细胞建立前列腺增生筛药模型
目的 建立原代培养大鼠前列腺上皮细胞体外筛药模型.方法 无菌状态下取雄性SD大鼠腹侧叶前列腺,称量后,剪成1 mm3小块,经Ⅱ型胶原酶消化1 h后,过滤、离心获取前列腺细胞,接种于24孔板培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定.获取的大鼠前列腺上皮细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12 d后给予系列剂量(0.1~1000 μmol/L)的他莫昔芬和阳性药物爱普列特处理72 h,利用CCK-8法检测前列腺上皮细胞存活率并计算药物IC50值,并进一步通过Giemsa染色后观察细胞生长及形态变化.结果 细胞鉴定结果显示,获取的细胞具典型上皮细胞形态特征,细胞角蛋白和前列腺特异性抗原表达阳性,提示所获细胞为前列腺上皮细胞.爱普列特与前列腺上皮细胞孵育72 h后,CCK-8法检测结果显示能够明显抑制前列腺上皮细胞生长,其IC50值为42.7 μM,进一步镜下观察结果显示,爱普列特未明显改变大鼠前列腺上皮细胞形态,但能导致存活细胞数减少.他莫昔芬则对大鼠前列腺上皮细胞生长无明显抑制作用,镜下观察前列腺上皮细胞数量和形态未见明显改变.结论 利用原代培养SD大鼠前列腺上皮细胞可以成功建立前列腺增生体外筛选模型.
前列腺增生、模型、上皮细胞、原代培养、药物筛选、大鼠
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Q95-33(动物学)
国家自然科学青年基金项目21007041;十二五"重大新药创制"科技重大专项2011ZX09301-005;上海市科委研发公共服务平台项目13DZ2291300;上海市人才发展基金资助项目201372
2013-12-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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