10.3969/j.issn.1005-4847.2011.03.015
大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取方法的比较
目的 比较两种肠内容物前处理和两种提取方法对清洁级SD大鼠肠内容物细菌基因组DNA提取效率.方法 分别选用PBS多次离心漂洗、液氮破细胞两种前处理方法和酚/氯仿抽提、试剂盒过柱法两种提取方法进行组合分析,对4份肠内容物和16份含金黄色葡萄球菌肠内容物进行随机提取.结果 大鼠肠内容物细菌基因组DNA含量和纯度测定结果显示,与PBS反复离心相比,液氮研磨前处理能显著提高大鼠肠内容物基因组DNA.荧光定量PCR表明,液氮研磨前处理较PBS反复离心能更好地收集细菌基因组DNA,其Ct值最低.结论 研究结果表明,采用液氮研磨试剂盒法在大鼠肠内容物DNA提取中是较为优良的方法,该方法为建立实验动物中微生物的定量PCR检测方法打下了基础.
实验动物、肠内容物、细菌、DNA提取方法
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Q95-33(动物学)
浙江省实验动物科技计划项目2008F80012,2009F80030;浙江省卫生厅省部共建项目WKJ2010-2-002
2011-10-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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