小鼠肝炎病毒N基因的原核表达和免疫活性初步分析

摘要：

目的 对小鼠肝炎病毒(mouse hapetitis virus)A59毒株核蛋白(N)基因进行了克隆、表达和重组蛋白的免疫活性分析.方法 根据GenBank公布的MHV-A59 N基因序列(AY700211),设计了一对特异性引物,通过RT-PCR扩增出N基因的主要抗原片段NS,将目的片段纯化后与pGEM-T-easy载体连接得到重组质粒pTN,双酶切回收目的基因片段克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,构建了重组质粒pGEX-Ns,转化大肠杆菌BL21,用IPTG进行了诱导表达.对表达裂解物进行SDS-PAGE和Western-blotting 验证.结果 表达产物相对分子质量约56×103与预期相符;能与MHV阳性血清发生特异性反应,出现单一条带.结论 原核表达的NP(S)蛋白有良好的抗原性,为检测小鼠肝炎病毒抗体的ELISA检测方法的研究奠定了基础.

关键词：小鼠肝炎病毒、N基因、克隆、原核表达

所属期刊栏目：16

分类号：R373.21(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：上海市科技发展基金064909007

在线出版日期：2008-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：265-269